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NK細(xì)胞抑制劑                                                                                                                                                   

Anti Asialo GM1(Anti AsGM1)

糖脂神經(jīng)節(jié)苷脂GM1(ASGM1)在感染病毒時(shí)的T細(xì)胞及自然殺傷(NK)細(xì)胞中表達(dá)。ASGM1局部存在于NK和CD8(+)細(xì)胞的脂筏結(jié)構(gòu)中，抗Asialo- GM1抗體可降低在各種小鼠、大鼠中的NK細(xì)胞活性。

接種抗Asialo-GM1抗體至實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，去除NK細(xì)胞，用于NK細(xì)胞的功能分析或移植其他物種來(lái)源的腫瘤組織至小鼠體內(nèi)^1）2）。

ASGM1也在嗜堿性細(xì)胞中表達(dá)，有報(bào)告稱，抗Asia-GM1抗體也可用于去除嗜堿性細(xì)胞^3）。

■ 參考文獻(xiàn)

◆原理介紹

　　 Anti Asialo-GM1（Rabbit）抗血清可以減少大鼠或者小鼠來(lái)源的自然殺傷細(xì)胞（NK 細(xì)胞）的活性。該抗體可以與 NK 細(xì)胞發(fā)生特異性結(jié)合，從而抑制 NK 細(xì)胞非特異性殺傷靶細(xì)胞的活性。NK 細(xì)胞是一種免疫監(jiān)視細(xì)胞，其靶細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞、同種異體移植的器官、組織等。可運(yùn)用于藥物篩選，器官移植，自身免疫疾病等研究。

　　每個(gè)產(chǎn)品有具體的體內(nèi)外的滴定數(shù)據(jù)。

◆特點(diǎn)

●　已經(jīng)體內(nèi)NK細(xì)胞活性驗(yàn)證

●　眾多文獻(xiàn)應(yīng)用案例

◆注射方法

小鼠-靜脈注射：

10-50 μL（推薦 20 μL）具體劑量由滴度和規(guī)格而定。第一次注射在４天內(nèi)有效，因此兩周內(nèi)需要注射３-４次。

大鼠-靜脈注射：

50-250 μL（小鼠劑量的４或５倍）具體劑量還須考慮大鼠的健康狀況、體重和 NK 活性。

小鼠和大鼠-腹腔給藥：

同等劑量或多于靜脈注射。

◆產(chǎn)品信息

 欲了解詳情請(qǐng)看相關(guān)資料

◆應(yīng)用案例

◆抗Asialo-GM1抗體體外活性

向抗Asialo-GM1抗體中添加豚鼠來(lái)源補(bǔ)體，并在BALB/c小鼠的胰腺細(xì)胞中進(jìn)行處理。通過(guò)靶向YAC-1細(xì)胞(●)體外檢測(cè)NK活性。

效應(yīng)子/靶標(biāo)的比率為50：1，○表示補(bǔ)體處理后BALB/c小鼠胰腺細(xì)胞的NK活性。

※ BALB/c小鼠經(jīng)聚(I:C)鈉鹽100 μg（0.2 mL的500 μg/ mL）處理后，正常飼養(yǎng)18小時(shí)后開(kāi)始下一步操作。

◆抗Asialo GM1抗體體內(nèi)活性

向BALB/c小鼠腹腔內(nèi)注射抗Asialo-GM1抗體，并檢測(cè)單次給藥（效應(yīng)子/靶標(biāo)= 50：1）3天后收集的胰腺細(xì)胞對(duì)YAC-1細(xì)胞的腫瘤溶解度。

※ BALB/c小鼠經(jīng)聚(I:C)鈉鹽100 μg（0.2 mL的500 μg/ mL）處理后，正常飼養(yǎng)18小時(shí)后開(kāi)始下一步操作。

■ 對(duì)照：正常兔血清

■ 抗Asialo-GM1抗體

※ 本頁(yè)面產(chǎn)品僅供研究用，研究以外不可使用。

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了解應(yīng)用案例

Anti Asialo GM1的抗血清可以與NK細(xì)胞（自然殺傷細(xì)胞）結(jié)合，抑制NK細(xì)胞非特異性殺傷靶細(xì)胞的活性。靶細(xì)胞包括腫瘤細(xì)胞，同種異體移植的器官、組織等?？捎糜谒幬锖Y選、器官移植、自身免疫疾病研究等。NK細(xì)胞屬于天然免疫細(xì)胞，具有免疫監(jiān)視功能。

　　特異性：小鼠、大鼠的NK細(xì)胞，小鼠單核細(xì)胞（不含有NK細(xì)胞的肝臟細(xì)胞，骨髓，胎兒肝臟細(xì)胞，裸鼠巨噬細(xì)胞的脾細(xì)胞），胎兒T淋巴細(xì)胞（12天）。

◆研究糖尿病的免疫治療

　　據(jù)報(bào)道，抗細(xì)胞凋亡細(xì)胞因子IL-15具有促進(jìn)NK細(xì)胞和T細(xì)胞（包括調(diào)節(jié)性T細(xì)胞，Tregs）存活和激活上述兩種細(xì)胞活性的功能。在患有糖尿病的NOD小鼠體內(nèi)反復(fù)注射IL-15。如果每天一次，注射2周，既不抑制也不加速未處理NOD小鼠患糖尿病的情況。但是NK細(xì)胞活性喪失的NOD小鼠注射IL-15可以明顯減少糖尿病的發(fā)病率和延遲糖尿病發(fā)病時(shí)間，但是NK細(xì)胞活性喪失不注射IL-15的小鼠依然病發(fā)糖尿病。在用IL-15處理，NK細(xì)胞活性喪失的NOD小鼠體內(nèi)產(chǎn)生的保護(hù)效應(yīng)與CD4⁺CD25⁺ Tregs免疫抑制活性增加有關(guān)。在該項(xiàng)實(shí)驗(yàn)中，用Anti AsGM1注射小鼠，抑制NK細(xì)胞活性，導(dǎo)致NOD小鼠NK細(xì)胞活性缺失。

參考文獻(xiàn)：Jinxing Xia et al., Clinica l Immunology.(2010) 134, 130–139 <全文>

◆研究敗血癥中NK細(xì)胞的功能

　　NK細(xì)胞和NKT細(xì)胞都屬于天然免疫系統(tǒng)，但在細(xì)菌引起的敗血癥中這兩種細(xì)胞的作用是有爭(zhēng)議。用Anti Asialo GM1處理小鼠，成為NK細(xì)胞活性抑制的小鼠；用CD1d單抗處理小鼠，成為NKT細(xì)胞活性抑制的小鼠；同時(shí)用同型對(duì)照單抗處理小鼠，作為陰性對(duì)照。之后這些小鼠感染肺炎鏈球菌。分析血清和組織樣品中細(xì)菌的含量，細(xì)胞因子，脾細(xì)胞凋亡率、用流式鑒定細(xì)胞，同時(shí)也分析脾細(xì)胞miRNA的表達(dá)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)NK細(xì)胞活性抑制的小鼠延長(zhǎng)了存活率。一旦NKT細(xì)胞激活抑制，與其他細(xì)胞群相比，脾臟的NK (CD3?/NK1.1+)細(xì)胞數(shù)目增加。NKT細(xì)胞活性抑制導(dǎo)致小鼠體內(nèi)的細(xì)菌含量升高，導(dǎo)致血清和脾細(xì)胞IFN-γ水平升高。抗CD1d處理小鼠的脾細(xì)胞miRNA分析顯示miR-200C和miR-29a下調(diào)，miR-125a-5p上調(diào)。這些變化發(fā)生在NK細(xì)胞活性抑制后。NK細(xì)胞可能與肺炎球菌肺炎的死亡率有關(guān)。抑制NKT細(xì)胞的激活導(dǎo)致(CD3?/NK1.1+)細(xì)胞數(shù)目增加，IFN-γ水平升高，改變脾細(xì)胞miRNA表達(dá)。

參考文獻(xiàn)：Eirini Christaki et al., Journal of Immunology Research, Volume 2015 (2015),Article 

　　　　　ID 532717, 10 pages <全文>

◆研究自身免疫性疾病的NK細(xì)胞功能

　　NK細(xì)胞是先天免疫淋巴細(xì)胞，在先天免疫和適應(yīng)性免疫中均起著關(guān)鍵性作用。它在小鼠體內(nèi)通過(guò)NK細(xì)胞消耗 Abs，特別是抗唾液酸GM1 (ASGM1)，起關(guān)鍵作用。此次研究中，我們通過(guò)整個(gè)嗜堿性粒細(xì)胞群體組成如表達(dá)NK細(xì)胞群一樣，來(lái)表達(dá)ASGM1以及CD49b（DX5），并通過(guò)抗ASGM1在體內(nèi)通過(guò)嗜堿性粒細(xì)胞消耗的抗FcεRIαAb有效地消融?？笰SGM1介導(dǎo)的嗜堿性粒細(xì)胞的消耗與各種小鼠品系的NK細(xì)胞消耗有關(guān)，與NK1同種異型和MHC H2單體型（包括C57BL/6，BALB/c，C3H和小鼠A/J）無(wú)關(guān)。這些結(jié)果將嗜堿性粒細(xì)胞定義為以前未被認(rèn)識(shí)到的抗ASGM1介導(dǎo)細(xì)胞消耗的靶標(biāo)，并引起人們對(duì)嗜堿性粒細(xì)胞的關(guān)注，而不是NK細(xì)胞或除了NK細(xì)胞外對(duì)抗ASGM1處理的小鼠中觀察到的某些表型。

參考文獻(xiàn)：Nishikado H, Mukai K, Kawano Y, et al. NK cell-depletinganti-asialo GM1 antibody exhibits 

　　　　　a lethal off-target effect on basophils invivo[J]. The Journal of Immunology, 

　　　　　2011, 186(10): 5766-5771<全文>

◆研究腫瘤的免疫治療

　　腫瘤的發(fā)展過(guò)程包括血管新生，腫瘤尺寸增大和腫瘤轉(zhuǎn)移。使用CXCL14/BRAK (CXCL14) 轉(zhuǎn)基因小鼠研究過(guò)度表達(dá)的CXC趨化因子配體14 (CXCL14) 在上述生物學(xué)現(xiàn)象中的作用。與野生型小鼠相比，轉(zhuǎn)基因小鼠經(jīng)AOM/DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸血管新生的發(fā)病率顯著低很多。腫瘤細(xì)胞注射到這些小鼠后，腫瘤尺寸發(fā)生變化。與野生型的相比，轉(zhuǎn)基因小鼠肺中轉(zhuǎn)移小瘤的數(shù)目明顯少，腫瘤的尺寸也明顯變小。在注射腫瘤前后注射Anti Asialo GM1減少了CXCL14在腫瘤生長(zhǎng)方面和腫瘤轉(zhuǎn)移的抑制效應(yīng)，表明激活的NK細(xì)胞在CXCL14介導(dǎo)的抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移期間起重要作用。CXCL14也表達(dá)在B16黑色素瘤細(xì)胞內(nèi)表明NK細(xì)胞在腫瘤轉(zhuǎn)移方面的重要性。而且轉(zhuǎn)基因小鼠在注射腫瘤細(xì)胞后的存活率顯著增長(zhǎng)。這些轉(zhuǎn)基因小鼠沒(méi)有明顯的不正常，預(yù)計(jì)腫瘤抑制/預(yù)防方面CXCL14起著重要作用。

參考文獻(xiàn)：Hata R et al.,Scientific Reports(2015) 5 : 9083 | DOI: 10.1038/srep09083 <全文>

◆參考文獻(xiàn)

◆其他文獻(xiàn)

本公司的抗Asialo-GM1抗體在以下為代表的各種文獻(xiàn)中均有應(yīng)用案例。